產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
本產(chǎn)品是專用于探針?lè)▽?shí)時(shí)熒光定量PCR 的預(yù)混體系。2×濃度，操作簡(jiǎn)單方便；新一代的高效熱啟動(dòng)酶，針對(duì)qPCR優(yōu)化的PCR buffer與增強(qiáng)劑，使本產(chǎn)品特異性強(qiáng)，靈敏度高，在寬廣的模板濃度范圍可以得到良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量準(zhǔn)確，重復(fù)性好，可信度高。
無(wú)需添加ROX Reference Dye：Roche LightCycler系列, MJ Research Chromo4, MJ Research Opticon 2, Takara TP-800, Bio-Rad系列, Thermo Scientific Pikoreal 96,Qiagen Corbett Rotor-Gene系列, Mastercycler ep realplex
添加Dye ROX A（50×）：Applied Biosystems 7500, 7500 Fast, QuantStudio 3, QuantStudio 5, QuantStudio 6, ViiA 7; Stratagene MX4000, MX3005P, MX3000P.
添加Dye ROX B（50×）：Applied Biosystems 5700, 7000, 7300, 7700, 7900, 7900HT, 7900HT Fast, StepOne, StepOnePlus
三步法熒光定量PCR
步驟 | 溫度 | 時(shí)間 |
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預(yù)變性 | 95℃ | 30 s |
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變性 | 95℃ | 10 s | 35-40 個(gè)循環(huán) |
退火 | 56-64℃ 1） | 10 s |
延伸 | 72℃ | 30 s 2） |
注意：
1）無(wú)法得到理想的擴(kuò)增效率時(shí)，適當(dāng)降低退火溫度；發(fā)生非特異性反應(yīng)時(shí)，提高退火溫度。
2）對(duì)于300bp以內(nèi)的片段，延伸時(shí)間30s即可，200bp以內(nèi)的片段，延伸時(shí)間20s即可。
